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    酶elisa試劑盒的基本原理

    發(fā)布時(shí)間： 2022-11-14　　點(diǎn)擊次數： 812次
     　　酶elisa試劑盒的基本原理盒一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應的基礎上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物，它可以催化底物分子發(fā)生反應，產(chǎn)生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA法是一種既敏感又特異的方法。
    　　
    　　ELISA的基本原理有三條：
    　?。?）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
    　?。?）抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
    　?。?）酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來(lái)判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
    　　
    　　ELISA樣本的處理：
    　　酶elisa試劑盒的檢測目的是為了實(shí)驗提供準確的實(shí)驗依據，為了保證實(shí)驗數據的可靠性，在實(shí)驗過(guò)程中必須堅持全面的質(zhì)量控制和全過(guò)程質(zhì)量控制，在收集標本前都必須有一個(gè)完整的計劃
    　　
    　　注意事項：
    　　1、每個(gè)樣本量收集體積=100ulx檢測種類(lèi)，如果要做復孔，標本量收集體積=100ulx檢測種類(lèi)x2；
    　　2、樣本收集后若在一周內進(jìn)行檢測可保存于2-8°C，若不及時(shí)檢測，請進(jìn)行分裝，凍存于-20°或-80°C，避免反復凍融
    　　3、試劑盒的檢測范圍不等同于樣本中待測物的濃度范圍，建議實(shí)驗前通過(guò)相關(guān)文獻預估樣本中待測物的濃度并通過(guò)預實(shí)驗確定樣本；
    　　4、血清標本采集是應注意避免溶血，紅細胞溶解是會(huì )釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，溶血標本可能會(huì )增加非特異性顯色；
    　　5、為了保證尿液檢測的準確性，必須正確收集尿液標本和保存，收集尿液的容器必須要清潔干燥，最好使用一次性的容器，避免因用藥并清潔不到而造成的污染，尿液樣本必須新鮮，留取后，應及時(shí)檢測或保存；
    　　6、標本宜在新鮮是檢測如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會(huì )產(chǎn)生假陽(yáng)性反應。如在冰箱中保存過(guò)久，其中可能發(fā)生聚合，間接法ELISA中樂(lè )視本底加深；
    　　7、反復凍融會(huì )使蛋白效價(jià)降低，所以待測樣本如需多次檢測，宜少量分裝凍存。
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