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    使用胎牛血清前是否需要進(jìn)行離心操作呢？

    發(fā)布時(shí)間： 2022-10-24　　點(diǎn)擊次數： 812次
    　　血清的質(zhì)量對實(shí)驗成敗起著(zhù)關(guān)鍵性作用，但血清使用不當也可能會(huì )導致血清質(zhì)量下降，造成細胞培養效果不理想。來(lái)自新西蘭的進(jìn)口胎牛血清很珍貴，大家在血清使用時(shí)怎樣確定血清使用濃度？
    　　
    　　這個(gè)只能通過(guò)測試了。原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細胞原代提取時(shí)會(huì )使用20%血清，大部分細胞正常培養時(shí)會(huì )使用5%～10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度，還需要根據細胞特性、實(shí)驗目的做測試和調整。
    　　
    　　血清使用前需要離心嗎？這個(gè)問(wèn)題有以下兩種可能：
    　　
    　　其一，因為血清融解后有“絮狀物”析出。
    　　
    　　如果沒(méi)有出現其他異常情況，或者血清只是用于細胞培養，那么*沒(méi)有必要離心去除。我們知道血清析出的“絮狀物”主要是血纖蛋白，其在血清中含量很高，而且高度不溶，在血清凍融過(guò)程中很容易析出，但它也是*無(wú)害的，甚至能促進(jìn)細胞生長(cháng)。
    　　
    　　另外，它還增強了胎牛血清的黏性，為細胞提供了額外的機械緩沖。在其析出過(guò)程中，會(huì )粘附培養體系中其他成分，離心去除，反而會(huì )損失營(yíng)養成分。
    　　
    　　其二，實(shí)驗要求純凈的培養體系。
    　　
    　　培養的細胞需要進(jìn)一步鑒定，如免疫熒光、流式、共聚焦拍照等，細胞表面如果有黏性較強的血纖蛋白，勢必會(huì )影響效果。
    　　
    　　那么，建議400g離心5min即可。如果需要進(jìn)行精密實(shí)驗，如分離外泌體等，那么就需要至少100000g離心1.5h以上。
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