Sigma試劑：胰蛋白酶(豬胰),T4799-100G,CAS:9002-07-7

屬性：

生物來(lái)源：Porcine pancreas

質(zhì)量水平：200

產(chǎn)品線(xiàn)：BioReagent

形式：lyophilized powder

specific activity：1,000-2,000 BAEE units/mg solid

分子量：23.8 kDa

濃度：25 mg/mL

應用：cell culture | mammalian: suitable

pH值（酸堿度）：7.6

運輸：ambient

儲存溫度：?20°C

一般描述：

憑借有效的作用和對不同類(lèi)型細胞的耐受性以及血清誘導的中和作用，胰蛋白酶可用于組織解離。

應用：

來(lái)自豬胰腺的胰蛋白酶已被用于消化雞骨頭。它還被用于分離黃體內皮細胞。。

對于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶:肽的使用比例約為1:100至1:20。本品的典型用途是使貼壁細胞從培養表面脫落。 使細胞解離所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類(lèi)型和培養物代數。 Trypsins也被用于細胞培養過(guò)程中的細胞再懸浮，在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中用于蛋白質(zhì)的消化，以及在各種凝膠消化中。 其他的應用包括通過(guò)基于膜的技術(shù)評估結晶，以及在一項研究中確定蛋白質(zhì)折疊速率和產(chǎn)量可以被動(dòng)力學(xué)陷阱的存在所限制。

包裝：

5, 10, 25, 100, 500 g in poly bottle

生化/生理作用：

胰蛋白酶可切割賴(lài)氨酸和精氨酸殘基的C末端肽段。 如果酸性殘基位于切割位點(diǎn)的任意一側，則該反應的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側，則水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH條件為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵。 將EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作為螯合劑，用于中和鈣離子和鎂離子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除這些離子會(huì )增加酶活性。
絲氨酸蛋白酶抑制劑（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）會(huì )抑制胰蛋白酶。

組分：

胰蛋白酶是由含223個(gè)氨基酸殘基的單鏈多肽組成的，它通過(guò)切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽鍵以去除N-末端六肽而獲得。 氨基酸序列通過(guò)6個(gè)二硫鍵交聯(lián)。 這是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser殘基處斷裂，產(chǎn)生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。

注意：

溶于1mM HCl的溶液分裝后可在-20℃穩定保存1年。Ca2+ 的存在也會(huì )降低胰蛋白酶的自水解性，保持其在溶液中的穩定性。 胰蛋白酶也將在2.0 M尿素、2.0 M鹽酸胍或0.1% (w/v) SDS中保持大部分活性。

單位定義：

一個(gè)BAEE單位以BAEE作為底物，在25°C、pH 7.6條件下每分鐘每毫升產(chǎn)生0.001的ΔA253 。一個(gè)BTEE單位=320個(gè)ATEE單位。反應體積=3.2mL（1cm的光徑）。

制備說(shuō)明：

本品為凍干粉，可以25mg/mL溶于Hank′s平衡鹽溶液。
對于需要EDTA的應用，溶解胰蛋白酶應該使用不含Ca2+ 或 Mg2+的緩沖鹽溶液.

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